Гепатит С – бир же бир нече РНК молекулаларынан турган Flaviviridae HCV вирусу себеп болгон боордун инфекциясы. Эреже катары, бейтапта С гепатитин аныктоо үчүн бир катар диагностикалык иш-чаралар жүргүзүлөт. ПЦР диагнозду так тастыктоочу анализ болуп саналат. Көбүнчө корутундуну врачтар пациентте оорунун алгачкы белгилери байкалганда беришет.
Гепатит С деген эмне
Кан же жыныстык катнаш аркылуу жугуучу вирустук инфекциянын боордун жабыркашы медицинада гепатит С деп аталат.. Козгучу - Flaviviridae тукумундагы клеткалык эмес инфекциялык агенттердин РНК камтыган вирусу. Инфекция организмде өзүн көрсөтпөстөн көпкө калышы мүмкүн. Ошондуктан, микроорганизм ПЦР РНК РНКсы аркылуу кандын анализи аркылуу аныкталганда гана гепатит С (диагноз катары) негиздүү деп эсептелет.
Флавивирус жасалма жол менен өстүрүлгөн изоляцияланган клеткаларда пайда болбойт. Көбөйүү процессинде инфекциялык агент иммунологиялык жактан айырмаланган модификацияларды жаратат. Бул факторлор организмдин берүүсүнө жол бербейттийиштүү коргоочу жооп жана эксперттер натыйжалуу вакцинаны иштеп чыгууда кыйынчылыктарга туш болушууда.
Вирус парентералдык жол менен жугат. Инфекция үчүн ал жетиштүү санда түз канга кириши керек.
С гепатитине кандай анализдер жасалат
Боордун вирустук патологиялары лабораториялык изилдөөлөрдүн жардамы менен аныкталат. С гепатитинин клиникалык изилдөөлөрү бейтаптын биоматериалында, негизинен кандагы бөтөн жана коркунучтуу антигендерди же белок кошулмаларын (антителолорду) изилдөө жолу менен жүргүзүлөт.
- Ферменттик иммундук анализ (ELISA). Метод кандагы lgM антителолорун аныктоого негизделген. Иммуноглобулин эң чоң жана пентамер болуп эсептелет. Ал лимфоциттердин белгисиз бөтөн затка биринчилик коргоочу реакциясында көрүнөт.
- Radioimmunoassay (RIA) - йоддун маркаланган радиоактивдүү изотопунун жардамы менен lgM иммуноглобулининин сандык аныктоосу.
- С гепатитинин ПТРи – биоматериалда (канда) вирустук РНКны аныктоо. Бул анализ диагнозду ишенимдүү тастыктайт.
IgG тести ишенимдүү эмес. Анын кандын сывороткасында болушу флавивирустун гана эмес, ошол эле патогендүү башка мурунку инфекциянын да бар экенин көрсөтөт.
ПЦР анализин эмне аныктайт
Полимераздык чынжыр реакциясы (ПТР) изилдөө үчүн материалдын үлгүлөрүндөгү (эпителий, кан) айрым патогендерге мүнөздүү ДНК аймактарын аныктоого негизделген. Анализ биологиялык материалда алардын РНКсын же ДНКсын аныктоо аркылуу патогендүү эң кичинекей организмдерди (вирустарды) аныктоого мүмкүндүк берет.
Антителолорду аныктоонун лабораториялык процедурасы Гепатит С ПТР 3 этапта жүргүзүлөт:
- Тандоо. Изилденген биоматериал кирлерден тазаланып, ДНК хроматографиялык колонканын мобилдик фазасында алынат.
- Күчөлөтүү. Талдоо аппарат-термостат циклинде жүргүзүлөт. Ал пробиркаларды белгилүү бир циклдүүлүк менен ысытат жана муздатат. Бир изилдөө үчүн 35 циклге чейин аткарылат. Натыйжада патогенди аныктоо, аныктоо жана баалоо үчүн жетиштүү сандагы ДНК фрагменттери түзүлдү.
- Электрофорез. Алынган фрагменттерди агароза ар кандай каныккан гельге салып, электрофорез жүргүзүшөт. Алынган электроферограмма компьютерде талданат.
Стандарттык ПТР изилдөөсү гана эмес, ошондой эле реалдуу убакыттагы ПТР анализи да колдонулат. Бул реалдуу убакыт диагностикасы. Метод сапаттык жана сандык талдоо жүргүзүүгө мүмкүндүк берет, бул оорунун пайда болушун жана динамикасын аныктоого, ошондой эле патологиянын келип чыгышынын себебин жоюуга багытталган терапияны дайындоого мүмкүндүк берет. Реалдуу убакыттагы ПТР инфекциялык агенттердин таза маданиятын аныктоо үчүн да колдонулат (генотиптөө).
Полимераздык чынжыр реакциясы сынагы кантип жүргүзүлөт
Диагностика үчүн адамдын каалаган биологиялык суюктугун колдонсо болот. С гепатитин текшерүү үчүн биоматериал көбүнчө кан болот.
Диагностика үчүн үлгү алуу процедуралык тартипте жүргүзүлөткеңсе. Кан алуу үчүн кандын уюшуна бөгөт коюучу заты бар бир жолу колдонулуучу пробиркаларды колдонуңуз. Инфекциялык агенттердин жайылышын алдын алууга багытталган иш-чаралар сырттан микроорганизмдердин башка штаммынын кирүүсүн алдын алууга жардам берет.
С гепатитинин ПТРине кан эртең менен ач карын алынат. Үлгү дароо лабораторияга жөнөтүлөт. Биоматериалды +4 градустан +8 градуска чейинки температурада сактоого уруксат берилет. Контейнерлер этикеткаланган жана багыттары менен камсыз кылынат. Сыноонун натыйжалары 48 сааттын ичинде, кээде эртерээк чыгат.
ПЦР түрлөрү
Полимераздык чынжыр реакциясын колдонуу диапазону абдан кеңири. Инфекционисттер ПЦР гепатити В, кан соргуч курт-кумурскалар аркылуу жугуучу ооруларды, СПИДди, кургак учукту колдонушат. Онкологияда бул ыкманы колдонуу менен шишик клеткалары алгачкы этапта аныкталат.
Талдоонун он төрткө жакын түрү бар. Тигил же бул түрүн колдонуу анализдердин көлөмүнө жана акыркы натыйжаларына жараша болот. ПЦРдин кээ бир түрлөрү 20 мүнөттүн ичинде жыйынтык керек болгон учурда өтө зарыл.
С гепатитин диагностикалоо үчүн полимераздык чынжыр реакциясынын 3 түрү колдонулат:
- Сапаттык баалоо организмде инфекциянын бар экенин көрсөткөн оң же флавивирустун жоктугун көрсөтүүчү терс болушу мүмкүн.
- Реалдуу убакыттагы ПТР (сандык анализ) - патогендин сандык РНКсын ХБ/мл менен аныктайт.
- Генотиптөө – бул вирустун түрүн (генотипти) ачкан анализ.
Ооруну так аныктоо жана аныктоо үчүн, андан кийинизилдөөлөрдүн үч түрү тең оптималдуу терапияны дайындоо үчүн колдонулат.
Сапаттык полимераздык чынжыр реакциясынын анализи
ИФАсы бар жана HCVге антителолорду тапкан ар бир адам үчүн анализ милдеттүү. Гепатит С үчүн сапаттык ПТР стандарттык сезгичтик тести болуп саналат. Метод аныктоого гана багытталган, башка заттарды эсептөө же изоляциялоо жүргүзүлбөйт.
Антителолорду аныктоо үчүн сезгичтик босогосу 50 IU/млден кем эмес атайын тесттик системалар колдонулат. Эгерде антителолор аныкталса, башка тактоочу тесттер дайындалат. Эгер натыйжа терс болсо, мындан ары текшерүү жүргүзүлбөйт.
Кээ бир учурларда, жалган терс натыйжа лабораториянын компетентсиз кызматкерлеринин же сапатсыз реагенттердин айынан болушу мүмкүн. Камсыздандыруу үчүн анализди башка жерден кайра тапшырганыңыз жакшы.
Сандык ПТР
Усул бир реакция циклинде флавивирустун санын түздөн-түз изилдөө үчүн колдонулат. Так өлчөө үчүн гибриддештирүү үчүн колдонулган ДНК фрагменттери же флуоресцент менен белгиленген праймерлер колдонулат. SYBL Green боегун колдонуу менен үнөмдүү аныктоо варианты бар. Боёк ДНКдагы кичинекей оюкка кыналган жана лазер менен нурланганда көк түскө айланат.
Концентрация санариптик эквивалентте күчөткүч-аппарат тарабынан аныкталат. Баалар лабораторияларда бир аз айырмаланышы мүмкүн, ошондуктан аларды маалымдама маанилери менен салыштыруу керек.
Сандык ПТРгепатит С дары оптималдуу дозасын тандоого жана терапиянын узактыгын аныктоого жардам берет. Изилдөөнүн жыштыгы оорунун стадиясына, генотиптин түрүнө жана белгиленген дарылоо курсуна жараша болот.
Генотипти аныктоо
Гепатит С вирусу өзгөрүлмө генетикалык түзүлүшкө ээ. Көптөгөн модификациялар вакцинаны түзүү мүмкүн эмес, ошондой эле терапияны татаалдаштырат. Жалпысынан 11 генотип жана 100 субтип аныкталып, катталган. Мурдагы СССР өлкөлөрүндө С гепатитин жуктурган адамдарда ПЦР негизинен 1b жана 3 генотиптерин аныктайт.
Генотиптердин кайсынысы болсо да, цирроз же боор рагы күлкүлүү болот. Ошондуктан вирусту өз убагында аныктоо абдан маанилүү.
Кээ бир бейтаптар үчүн HCV менен күрөшүүгө арналган кээ бир дарылар уулуу. Генотиптөө протеиндин түрүн аныктоого жана эффективдүү дары жазып берүүгө мүмкүндүк берет.
Терилген тесттердин жыйынтыгында вирустун генотибин көрсөткөн кичинекей латын тамгасы бар сан бар. Эгерде HCV аныкталса, бирок терилбесе, бул адамдын белгилүү бир географиялык аймакка мүнөздүү болбогон генотипке ээ экенин билдирет.
Талдоо натыйжалары
Доктур жыйынтыктарды чечмелөө менен алектенет. Бир нече изилдөөлөрдөн алынган маалыматтар гана (анамнез жана экспертиза менен бирге) оорунун тарыхынын жалпы реалдуу сүрөтүн бере алат.
- Дени сак адамда биоматериалда сапаттык реакцияга тест эч нерсени аныктабайт. Эгерде "аныкталган" мааниси көрсөтүлсө, инфекция тастыкталат жана пациенткошумча диагноздон кийин дарылоо керек.
- Инфекциялык агенттердин санын аныктоо организмге вирустук жүктү баалоого мүмкүндүк берет. Адатта, гепатит С сандык ПТР патогенди аныктабайт. 810^5 чейин көрсөткүч төмөн жүк катары каралат жана туура терапия менен, жагымдуу натыйжага кепилдик берет. Жогорку маанилер терең текшерүүнү жана узак мөөнөттүү терапияны аныктоону талап кылат, анын оң натыйжасына эч ким кепилдик бере албайт.
- Генотиптөөнүн оң натыйжалары кайсы генотип таанылганын көрсөтөт. Терс натыйжа флавивирустун жоктугун же бул аймакка мүнөздүү болбогон генотиптин бар экенин көрсөтөт.
Оң ПЦР тести эмнени көрсөтөт
Ар кандай олуттуу оору комплекстүү диагнозду талап кылат. Оң гепатит С ПТР диагнозду ырастайт, бирок кошумча лабораториялык жана инструменталдык изилдөөлөрдөн кийин гана божомол айтууга болот.
Вирустун табылышы патологиянын толук сүрөтүн бербейт. Анын түрүн жана мүнөзүн аныктоо, боорго жана башка органдарга кандай таасир тийгизерин аныктоо зарыл. HCVди эрте аныктоо көбүнчө жакшы терапиялык натыйжа берет.
Оң ELISA менен терс ПТР
Боордун бузулушуна мүнөздүү симптомдорду байкаганда инфекциянын организмге кирип кеткендигинин ыктымалдуулугу жогору. Андыктан гепатологго же инфекционистке кайрылуу керек. Маектешүү учурунда адис анамнезди чогултуп, керектүү экспертизаны дайындайт.
Эгергепатит С ПТР боюнча изилдөөлөрдүн натыйжалары терс, ал эми иммуноферменттин анализи оң, бул кандагы флавивируска каршы антителолордун бар экендигин көрсөтүп турат. Бул, адатта, инфекция организмге аз санда киргенде болот, ошондуктан иммундук система аны менен өз алдынча күрөшкөн. Бирок мындай адамдар дагы эле инфекция жуккан деп эсептелинип, 6 ай сайын текшерүүдөн өтүшү керек. Эгерде мындай анализдин жыйынтыгы менен адам акысыз медициналык текшерүүдөн баш тартылса, ден соолугун сактоо үчүн акы төлөнүүчү ПЦР тапшырган жакшы, ал эми жыйынтыктар оң болсо, диагностика жана дарылоо үчүн адиске кайрылыңыз.
Усулдун артыкчылыктары жана кемчиликтери
Гепатит С диагнозун коюуда ПЦР бир нече артыкчылыктарга ээ:
- Патогендерди эрте аныктоо.
- Вирустун так аныктамасы.
- Диагностиканын эффективдүүлүгү.
- Миминалдуу ката ылдамдыгы.
- Жогорку сезгичтик.
Усулдун кемчиликтери:
- Анализдин жогорку баасы. Сыноо үчүн кымбат баалуу жабдуулар, реагенттер жана жогорку квалификациялуу медициналык кызматкерлер керектелет. Баары чогуу бир топ сумманы түзөт.
- Биоматериалды ташуу үчүн катуу талаптар.
Боордун сезгенүүсүн дарылоо
С гепатитинин вирусуна ПТР анализи диагностика үчүн негиз болуп эсептелет, бирок так эмес. Терапия натыйжалуу болушу үчүн бир катар кошумча лабораториялык жана аспаптык изилдөөлөр талап кылынат. Баарын өткөндөн кийиндарыгер дарылоону дайындайт диагностикалык чаралар:
- Диета №5 жазылган.
- Алкоголь толугу менен жок.
- Интерферон менен Рибавиринди 25 күн бирге кабыл алуу.
- Гепапротекторлордун курстары "Эссенциале", "Карсил", "Фосфоглив".
- Өзгөчө учурларда дискреттик плазмаферез колдонулат.
Гепатолог жазып берген дарылар дозасын өзгөртпөстөн үзгүлтүксүз колдонулат. Дары-дармектерди кабыл алуунун узактыгы контролдук тесттерден өткөндөн кийин дарыгер тарабынан аныкталат. Терапия курсун аяктагандан кийин, алты ай сайын доктурга барып туруу керек.
ПЦР-диагностика С гепатитинин козгогучту алгачкы этапта аныктоого мүмкүндүк берет. Бул терапиянын эффективдүүлүгүнө жана оорунун цирроз жана гепатоцеллюлярдык рак сыяктуу коркунучтуу түргө өтүшүн алдын алууга көмөктөшөт.
