Дерлик баардык жугуштуу оорулардын лабораториялык диагностикасы оорулуунун канында козгогучтун антигендерине каршы пайда болгон антителолорду серологиялык реакциялардын методдору менен аныктоого негизделген. Алар медициналык практикага он тогузунчу кылымдын аягынан 20-кылымдын башына чейин киришкен.
Илимдин өнүгүшү микробдордун антигендик түзүлүшүн жана алардын ууларынын химиялык формулаларын аныктоого жардам берди. Бул терапиялык гана эмес, диагностикалык сывороткаларды да түзүүгө мүмкүндүк берди. Алар лабораториялык жаныбарларга аттенуацияланган козгогучтарды берүү жолу менен алынат. Бир нече күн тийгенден кийин коёндордун же чычкандардын каны серологиялык тесттердин жардамы менен микробдорду же алардын токсиндерин аныктоо үчүн колдонулган препараттарды даярдоо үчүн колдонулат.
Мындай реакциянын сырткы көрүнүшү анын пайда болуу шарттарына жана пациенттин канындагы антигендердин абалына көз каранды. Эгерде микробдук бөлүкчөлөр эрибес болсо, алар сывороткада чөктүрүшөт, лизишет, байланат же кыймылсыз калышат. Эгерде антигендер эрүүчү болсо, анда нейтралдаштыруу же преципитация көрүнүшү пайда болот.
Агглютинация реакциясы (RA)
Серологиялык агглютинация тести өтө өзгөчө. Аны аткаруу оңой жана абданвизуалдык, пациенттин кан сывороткасында антигендердин бар экендигин тез аныктоо үчүн. Ал Vidal реакциясын (ич келте жана паратиф оорусунун диагностикасы) жана Вайглдын (келте оорусу) текшерүү үчүн колдонулат.
Ал адамдын антителолору (же агглютининдер) менен микробдук клеткалардын (аглютеногендер) ортосундагы спецификалык өз ара аракеттенүүгө негизделген. Алардын өз ара аракеттенүүсүнөн кийин чөктүрүүчү бөлүкчөлөр пайда болот. Бул оң белги. Реакцияны орнотуу үчүн тирүү же өлтүрүлгөн микробдор, козу карындар, жөнөкөй клеткалар, кан клеткалары жана соматикалык клеткалар колдонулушу мүмкүн.
Химиялык жактан реакция эки баскычка бөлүнөт:
- Антителолордун (АТ) антигендер (AG) менен спецификалык байланышы.
- Спецификалык эмес - AG-AT конгломераттарынын чөгүшү, башкача айтканда агглютинаттын пайда болушу.
Кыйыр эмес агглютинация реакциясы (IPHA)
Бул реакция мурункусуна караганда сезгич. Ал бактериялар, клетка ичиндеги мителер жана жөнөкөйлөр себеп болгон ооруларды аныктоо үчүн колдонулат. Ал ушунчалык спецификалык болгондуктан, антителолордун өтө төмөн концентрациясын да аныктоого болот.
Тазаланган койдун эритроциттери жана адамдын эритроциттери антитело же антигендер менен алдын ала иштетилет (лабораториянын эмне тапкысы келгенине жараша). Кээ бир учурларда, адамдын кызыл кан клеткалары иммуноглобулиндер менен дарыланат. Эритроциттердин серологиялык реакциялары, эгерде алар түтүктүн түбүнө жайгашса, өттү деп эсептелет. Оң реакция жөнүндөклеткалар бүт түбүн ээлеп, тескери кол чатыр түрүндө тизилгенде деп. Эритроциттер мамычага же ылдый жагынын ортосуна кнопка түрүндө жайгашса терс реакция эсептелет.
Жаан-чачын реакциясы (RP)
Ушул түрдөгү серологиялык реакциялар антигендердин өтө майда бөлүкчөлөрүн аныктоо үчүн колдонулат. Бул, мисалы, белоктор (же анын бөлүктөрү), белоктордун липиддер же углеводдор менен кошулмалары, бактериялардын бөлүктөрү, алардын токсиндери болушу мүмкүн.
Реакция үчүн сывороткалар жаныбарларды, көбүнчө коёндорду жасалма жол менен жугузуу жолу менен алынат. Бул ыкма менен, сиз таптакыр каалаган преципитациялоочу сыворотка аласыз. Серологиялык преципитация реакцияларынын түзүлүшү аракет механизми боюнча агглютинация реакцияларына окшош. Сывороткадагы антителолор коллоиддик эритмедеги антигендер менен биригип, протеиндин түбүнө же субстратка (гель) чогулган чоң белок молекулаларын пайда кылат. Бул ыкма өтө спецификалык деп эсептелет жана заттын анчалык деле аз өлчөмдөгү көлөмүн аныктай алат.
Чума, туляремия, күйдүргү, менингит жана башка ооруларды аныктоо үчүн колдонулат. Мындан тышкары, ал соттук-медициналык экспертизага тартылган.
Гелдин тундурма реакциясы
Серологиялык реакцияларды суюк чөйрөдө гана эмес, агар гелинде да жүргүзүүгө болот. Бул диффузиялык жаан-чачындын ыкмасы деп аталат. Анын жардамы менен татаал антигендик аралашмалардын курамы изилденет. Бул ыкма антигендердин антителолорго жана тескерисинче химотаксисине негизделген. Гельде алар кыймылдайтбири-бирине ар кандай ылдамдыкта жана жолугуп, жаан сызыктарын түзүшөт. Ар бир сап AG-ATтин бир топтому.
Экзотоксинди антитоксин менен нейтралдаштыруу реакциясы (PH)
Антитоксиктүү сывороткалар микроорганизмдер чыгарган экзотоксиндин аракетин нейтралдаштырууга жөндөмдүү. Бул серологиялык реакциялар ушуга негизделген. Микробиология бул ыкманы сывороткаларды, токсиндерди жана токсоиддерди титрлөө жана алардын терапиялык активдүүлүгүн аныктоо үчүн колдонот. Токсиндерди нейтралдаштыруу күчү кадимки бирдиктер менен аныкталат - AE.
Мындан тышкары, бул реакциянын аркасында экзотоксиндин түрүн же түрүн аныктоого болот. Бул селейме, дифтерия, ботулизм ооруларын аныктоодо колдонулат. Изилдөө "айнекте" да, гелде да жүргүзүлүшү мүмкүн.
Лизис реакциясы (RL)
Оорулуунун организмине кирген иммундук сыворотка, пассивдүү иммунитеттин негизги функциясынан тышкары, лизингдик касиетке да ээ. Ал оорулуунун организмине кирген микробдук агенттерди, клеткалык бөтөн элементтерди жана вирустарды эрите алат. Сарысуга кирген антителолордун өзгөчөлүгүнө жараша бактериолизиндер, цитолизиндер, спирохетолизиндер, гемолизиндер жана башкалар бөлүнөт.
Бул спецификалык антителолор "комплемент" деп аталат. Ал адамдын денесинин дээрлик бардык суюктуктарында кездешет, белоктун татаал структурасына ээ жана температуранын көтөрүлүшүнө, титиреп, кислоталарга жана күн нуруна өтө сезгич. Ал эми кургатылган абалда сактап калууга жөндөмдүүанын лизингдик касиеттери алты айга чейин.
Бул типтеги серологиялык реакциялардын мындай түрлөрү бар:
- бактериолиз;
- гемолиз.
Бактериолиз пациенттин кан сывороткасын жана тирүү микробдор менен спецификалык иммундук сыворотканы колдонуу менен жүргүзүлөт. Эгерде канда толуктоочу жетиштүү болсо, анда изилдөөчү бактериялардын лизисин көрүп, реакция оң деп эсептелет.
Кандын экинчи серологиялык реакциясы оорулуунун эритроциттеринин суспензиясын гемолизиндер камтыган сыворотка менен дарылоодо, алар белгилүү бир комплимент болгондо гана активдештирилет. Эгерде бар болсо, анда лаборант кызыл кан клеткаларынын эришине байкоо салат. Бул реакция заманбап медицинада кандын сывороткасындагы комплемент титринин (б.а. анын эритроциттердин лизисин козгоочу эң аз өлчөмүн) аныктоо жана комплементтин фиксациясына анализ жүргүзүү үчүн кеңири колдонулат. Мына ушундай жол менен сифилиске серологиялык тест жүргүзүлөт - Вассерман реакциясы.
Комплементтин фиксация реакциясы (CFR)
Бул реакция пациенттин кан сары суусунда инфекциялык агентке антителолорду аныктоо, ошондой эле патогенди антигендик түзүлүшү боюнча аныктоо үчүн колдонулат.
Ушул учурга чейин биз жөнөкөй серологиялык реакцияларды сүрөттөп бердик. RSK татаал реакция болуп эсептелет, анткени анда эки эмес, үч элемент: антитело, антиген жана комплемент өз ара аракеттенет. Анын маңызы антитело менен антигендин өз ара аракеттенүүсүндө туратпайда болгон AG-AT комплексинин бетинде адсорбцияланган комплемент белокторунун катышуусунда гана пайда болот.
Антигендер өзүлөрү комплемент кошулгандан кийин олуттуу өзгөрүүлөргө дуушар болушат, алар реакциянын сапатын көрсөтөт. Бул лизис, гемолиз, иммобилизация, бактерициддик же бактериостатикалык аракет болушу мүмкүн.
Реакциянын өзү эки фазада жүрөт:
- Экспертизанын көзүнө көрүнбөгөн антиген-антитело комплексинин пайда болушу.
- Комплементтин таасири астында антигендин өзгөрүшү. Бул фазаны көбүнчө көз менен байкоого болот. Эгерде реакция көзгө көрүнбөсө, анда өзгөртүүлөрдү аныктоо үчүн кошумча индикатор системасы колдонулат.
Индикатор системасы
Бул реакция комплемент фиксациясына негизделген. Тазаланган кочкор эритроциттери жана комплементсиз гемолитикалык сыворотка РСК коюлгандан бир сааттан кийин пробиркага кошулат. Эгерде пробиркада байланышпаган комплемент кала берсе, анда ал койдун кан клеткалары менен гемолизиндин ортосунда пайда болгон AG-AT комплексине кошулуп, алардын эришине алып келет. Бул RSK терс экенин билдирет. Эгерде эритроциттер бүтүн бойдон калса, демек, реакция оң болот.
Гемагглютинация тести (RGA)
Негизинен эки башка гемагглютинация реакциясы бар. Алардын бири серологиялык, ал кан топторун аныктоо үчүн колдонулат. Бул учурда кызыл кан клеткалары антителолор менен өз ара аракеттенет.
Жана экинчисиреакция серологиялык реакцияга тиешеси жок, анткени кызыл кан клеткалары вирустар чыгарган гемагглютининдер менен реакцияга кирет. Ар бир козгогуч белгилүү бир эритроциттерге (тоок, козу, маймыл) гана таасир эткендиктен, бул реакцияны өтө спецификалык деп эсептөөгө болот.
Сиз реакциянын оң же терс экенин пробирканын түбүндөгү кан клеткаларынын жайгашкан жеринен биле аласыз. Эгерде алардын үлгүсү тескери кол чатырга окшош болсо, анда керектүү вирус пациенттин канында болот. Ал эми эритроциттердин баары тыйын мамычасындай пайда болсо, анда каалаган козгогучтар жок.
Гемагглютинацияны токтотуу тести (HITA)
Бул вирустун түрүн, түрүн же пациенттин кан сары суусунда спецификалык антителолордун бар экендигин аныктоого мүмкүндүк берген өтө спецификалык реакция.
Анын маңызы пробиркага пробиркага пробиркага кошулган антителолордун эритроциттерге антигендердин түшүшүнө жол бербөө, ошону менен гемагглютинацияны токтотууда. Бул изделип жаткан спецификалык вирустун канында спецификалык антигендер бар экендигинин сапаттык белгиси.
Иммунофлуоресценттик реакция (RIF)
Реакция AG-AT комплекстерин флуорохромдук боёктор менен иштетүүдөн кийин флуоресценттик микроскопия менен аныктоо мүмкүнчүлүгүнө негизделген. Бул ыкма менен иштөө оңой, таза маданиятты бөлүп алууну талап кылбайт жана аз убакытты талап кылат. Бул жугуштуу ооруларды тез диагностикалоо үчүн зарыл.
Практикада бул серологиялык реакциялар эки түргө бөлүнөт: түз жана кыйыр.
Direct RIF өндүрүлгөнфлуоресценттик сыворотка менен алдын ала иштетилген антиген. Ал эми кыйыр түрдө адегенде дары кызыктырган антителолор үчүн антигендерди камтыган кадимки диагностикум менен дарыланат, андан кийин AG-AT комплексинин белокторуна мүнөздүү болгон люминесценттик сыворотка кайра колдонулат жана микроб клеткалары. микроскоптун астында көрүнүп калат.
