Бактерияларды изилдөө адамдар үчүн абдан чоң практикалык мааниге ээ. Бүгүнкү күнгө чейин бири-биринен патогендүүлүгү, таралуу аймагы, формасы, өлчөмү, желекчесинин саны жана башка көрсөткүчтөрү боюнча айырмаланган көп сандагы прокариоттор ачылган. Бул штаммды кеңири изилдөө үчүн бактериологиялык изилдөө ыкмасы колдонулат.
Бактерия клеткаларын анализдөөнүн кандай ыкмалары бар?
Бактериялардын патогендүү экендигин аныктоо үчүн, маданият ар кандай жолдор менен каралат. Алардын арасында:
1. Бактериоскопиялык ыкма.
2. Бактериологиялык ыкма.
3. Биологиялык ыкма.
Бактериоскопиялык жана бактериологиялык изилдөө ыкмалары түздөн-түз прокариоттук клеткалар менен иштөөгө негизделген, мында эксперименталдык жаныбарлардын тирүү организмине мындай клеткалардын таасирин изилдөө үчүн биологиялык анализ талап кылынат. Оорунун белгилүү бир белгилерин көрсөтүү даражасына ылайык, окумуштуу жасай алатүлгүдөгү патогендик бактериялардын бар же жок экендиги жөнүндө корутунду, ошондой эле алардын маданиятын алуу жана башка иштерде колдонуу үчүн жаныбарлардын организминде табигый түрдө көбөйтүлөт.
Изилдөөнүн бактериологиялык ыкмасы бактериоскопиялыктан айырмаланат. Биринчисинде анализ үчүн тирүү прокариоттордун атайын даярдалган маданияты колдонулат, экинчисинде айнек слайддагы өлүк же тирүү клеткалар менен иш жүргүзүлөт.
Бактериологиялык изилдөө методунун этаптары. Микробиология
Бактерия культурасынын касиеттерин изилдөө принциби прокариоттук клеткаларды изилдөө максатын койгон микробиологдор үчүн да, бактериялардын патогендүүлүгүн же патогендүүлүгүн аныктоо милдети болгон лаборанттар үчүн да пайдалуу болушу мүмкүн. анда пациентке диагноз коюңуз.
Бактерияларды изилдөө ыкмасы үч этапка бөлүнөт:
1. Баштапкы үлгүдөгү бактерияларды бөлүп алуу.
2. Бактерияларды себүү жана таза маданиятты өстүрүү, анын касиеттерин изилдөө.
3. Бактериялык клеткалардын деталдуу изилдөөсү.
Биринчи этап
Үлгү, же мазок чөйрөнүн бош бетинен же пациенттен алынат. Ошентип, биз азыктандыруучу чөйрөгө себүү керек бактериялардын көптөгөн түрлөрүнүн "коктейлин" алабыз. Кээде организмде таралуу очокторун билип, керектүү бактерияларды дароо бөлүп алууга мүмкүн болуп калат.
Эки же үч күндөн кийин керектүү колониялар тандалып алынат жанаСтерилдүү илмектин жардамы менен Петри табактын катуу чөйрөсүнө себилет. Көптөгөн лабораториялар катуу же суюк азык чөйрөсүн камтыган пробиркалар менен иштешет. Микробиологиядагы изилдөөнүн бактериологиялык ыкмасы мына ушундайча ишке ашат.
Экинчи этап
Бактериялардын жеке колонияларын алгандан кийин түз макро- жана микроанализ жүргүзүлөт. Колониялардын бардык параметрлери ченелет, алардын ар биринин түсү жана формасы аныкталат. Колонияларды Петри табакчасында, анан баштапкы материалда санап чыгуу сейрек эмес. Бул патогендик бактерияларды талдоодо маанилүү, алардын саны оорунун даражасына жараша болот.
Изилдөөнүн бактериологиялык ыкмасы, 2-этап микроорганизмдердин айрым колонияларын изилдөө, бактерияларды анализдөөнүн биологиялык ыкмасы менен байланыштырылышы мүмкүн. Бул этапта иштөөнүн дагы бир максаты - баштапкы материалдын көлөмүн көбөйтүү. Бул азыктандыруучу чөйрөдө жасалышы мүмкүн, же тирүү эксперименталдык организмдерге in vivo эксперимент жүргүзүүгө болот. Патогендик бактериялар көбөйүп, натыйжада кан миллиондогон прокариоттук клеткаларды камтыйт. Алынган кандан бактериялардын керектүү жумушчу материалын даярдоо оңой.
Үчүнчү этап
Изилдөөнүн эң маанилүү бөлүгү – бактерия культурасынын морфологиялык, биохимиялык, токсигендик жана антигендик касиеттерин аныктоо. Иш азыктандыруучу чөйрөдө алдын ала тазаланган культуралар менен, ошондой эле микроскоптун астында препараттар менен (көбүнчө боёлгон) жүргүзүлөт.
Ээликти коюңузпатогендик же шарттуу бактерияларды тигил же бул системалуу топторго, ошондой эле алардын дары-дармектерге туруктуулугун аныктоого изилдөөнүн бактериологиялык ыкмасына мүмкүндүк берет. 3-этап - антибиотиктер, б.а. чөйрөдөгү дары-дармектердин курамынын шарттарында бактериялык клеткалардын жүрүм-турумун талдоо.
Маданияттын антибиотиктерге туруктуулугун изилдөө конкреттүү пациентке керектүү, эң негизгиси эффективдүү дарыларды жазып берүү зарыл болгон учурда чоң практикалык мааниге ээ. Бул жерде бактериологиялык изилдөө ыкмасы жардам берет.
Өсүү каражаты деген эмне?
Өнүгүү жана көбөйүү үчүн бактериялар алдын ала даярдалган азык чөйрөсүндө болушу керек. Консистенциясы боюнча алар суюк же катуу, ал эми келип чыгышы боюнча - өсүмдүк же жаныбар болушу мүмкүн.
Негизги медиа талаптар:
1. Стерилдүүлүк.
2. Максималдуу тунуктук.
3. Кислоттуулуктун, осмостук басымдын, суунун активдүүлүгүнүн жана башка биологиялык баалуулуктардын оптималдуу көрсөткүчтөрү.
Изоляцияланган колонияларды алуу
1. Дригалский ыкмасы. Бул микроорганизмдердин ар кандай түрлөрү менен мазок бактериялык укурук колдонулат экенин турат. Бул илмек азык чөйрөсү менен биринчи Петри табакчасынан өткөрүлөт. Андан ары, укурук өзгөртпөстөн, калдык материал ыкмасы экинчи жана үчүнчү Петри табактарды жүзөгө ашырылат. Ошентип, колониянын акыркы үлгүлөрүндө бактериялар өтө жыш отургузулбайт, ошону менен жумушка керектүүлөрдү табуу мүмкүнчүлүгүн жеңилдетет.бактерия.
2. Кох ыкмасы. Ал үчүн эриген азык чөйрөсү бар пробиркалар колдонулат. Ал жерге бактериянын мазогу бар илмек же пипетка коюлат, андан кийин пробирканын ичиндегилер атайын пластинкага куюлат. Агар (же желатин) бир канча убакыт өткөндөн кийин катып калат жана анын калыңдыгынан керектүү клетка колонияларын табуу оңой. Микроорганизмдердин концентрациясы өтө жогору болбошу үчүн пробиркалардагы бактериялардын аралашмасын жумушка киришер алдында суюлтуу маанилүү.
Изилдөөнүн бактериологиялык ыкмасы, этаптары бактериялардын керектүү маданиятын бөлүп алууга негизделген, обочолонгон колонияларды табуу үчүн бул эки ыкмасыз мүмкүн эмес.
Антибиограмма
Бактериялардын дарыларга реакциясын эки практикалык жол менен көрүүгө болот:
1. Кагаз диск ыкмасы.
2. Суюк чөйрөдө бактерияларды жана антибиотикти көбөйтүү.
Кагаз диск ыкмасы катуу азыктандыруучу чөйрөдө өстүрүлгөн микроорганизмдердин маданиятын талап кылат. Мындай чөйрөгө антибиотиктерге чыланган бир нече тегеректелген кагазды коюңуз. Эгерде дары ийгиликтүү справиться менен нейтрализации бактериялык клеткалардын, кийин мындай дарылоо болот зонасы жок колония. Эгерде антибиотикке реакция терс болсо, бактериялар аман калат.
Суюк азыктандыруучу чөйрөнү колдонгон учурда, алгач ар кандай суюлтуудагы бактериялардын культурасы бар бир нече пробирканы даярдаңыз. Бул пробиркаларга антибиотиктер кошулуп, сутка ичинде зат менен микроорганизмдердин өз ара аракеттенүү процесси байкалат. Натыйжада жогорку сапаттагы антибиограмма алынат, ага ылайык аны жасоого болотберилген түшүм үчүн дары натыйжалуулугун баалоо.
Талдоонун негизги милдеттери
Бул жерде изилдөөнүн бактериологиялык ыкмасынын максаттары жана этаптары келтирилген.
1. Бактериялык колонияларды изоляциялоо үчүн колдонула турган баштапкы материалды алыңыз. Бул кандайдыр бир нерсенин бетинен, былжыр челден же адамдын органынын көңдөйүнөн чыккан мазок, кан анализи болушу мүмкүн.
2. Маданиятты катуу азыктандыруучу чөйрөдө өстүрүү. 24-48 сааттан кийин Петри табагынан ар кандай типтеги бактериялардын колонияларын табууга болот. Биз морфологиялык жана/же биохимиялык критерийлерге ылайык каалаганын тандап, аны менен андан ары иш алып барабыз.
3. Алынган маданиятты жайылтуу. Бактериологиялык изилдөө методу бактериялык культуралардын санын көбөйтүүнүн механикалык же биологиялык ыкмасына негизделиши мүмкүн. Биринчи учурда, иш катуу же суюк азык чөйрөсү менен жүргүзүлөт, анын үстүндө бактериялар термостатта көбөйүп, жаңы колонияларды түзүшөт. Биологиялык ыкма бактериялардын санын көбөйтүү үчүн табигый шарттарды талап кылат, ошондуктан бул жерде эксперименталдык жаныбар микроорганизмдер менен ооруйт. Бир нече күндөн кийин көптөгөн прокариотторду кан үлгүсүндө же мазуттан табууга болот.
4. Тазаланган маданият менен иштөө. Бактериялардын системалуу абалын, ошондой эле алардын козгогучтарга тиешелүүлүгүн аныктоо үчүн клеткалардын морфологиялык жана биохимиялык мүнөздөмөлөрү боюнча кылдат талдоо жүргүзүү зарыл. Микроорганизмдердин патогендик топторун изилдөөдө аны билүү зарылантибиотиктер канчалык эффективдүү.
Бул бактериологиялык изилдөө ыкмасынын жалпы мүнөздөмөсү болгон.
Анализдин өзгөчөлүктөрү
Бактериологиялык изилдөөнүн негизги эрежеси – максималдуу тукумсуздук. Эгерде сиз пробиркалар менен иштеп жатсаңыз, бактериялардын культуралары жана субкультуралары ысытылган спирт лампасынын үстүндө гана жүргүзүлүшү керек.
Бактериологиялык изилдөө ыкмасынын бардык этаптары атайын циклди же Пастер пипеткасын колдонууну талап кылат. Эки аспап тең спирт лампасынын жалында алдын ала иштетилиши керек. Пастер пипеткасына келсек, бул жерде термикалык стерилизациядан мурун пипетканын учун кычкач менен үзүү керек.
Бактерияларды себүү техникасынын да өзүнүн өзгөчөлүктөрү бар. Биринчиден, катуу чөйрөгө эмдөөдө агардын бетинен бактериялык илмек өткөрүлөт. Укук, албетте, бетинде микроорганизмдердин үлгүсү болушу керек. Маданият чөйрөсүнө эмдөө да практикаланат, бул учурда цикл же пипетка Петри табактын түбүнө жетиши керек.
Суюк чөйрө менен иштөөдө пробиркалар колдонулат. Бул жерде суюктуктар лабораториялык айнек идиштердин же тыгындардын четтерине тийбеши керек, ал эми колдонулган аспаптар (пипетка, илмек) бөтөн нерселерге жана беттерге тийбеши керек.
Биологиялык изилдөө методунун мааниси
Бактериялардын үлгүсүн талдоо өзүнүн практикалык колдонмолоруна ээ. Баарынан мурунбактериологиялык изилдөө методу медицинада колдонулушу мүмкүн. Мисалы, туура диагноз коюу, ошондой эле дарылоонун туура курсун иштеп чыгуу үчүн пациенттин микрофлорасын изилдөө керек. Бул жерде дарылардын козгогучка каршы активдүүлүгүн көрсөткөн антибиотик жардам берет.
Бактериялардын анализи лабораторияда кургак учук, кайталануучу ысытма же гонорея сыяктуу коркунучтуу ооруларды аныктоо үчүн колдонулат. Ал ошондой эле бадамча бездеринин, органдардын көңдөйлөрүнүн бактериялык курамын изилдөө үчүн колдонулат.
Айлана-чөйрөнүн булганышын аныктоо үчүн бактериологиялык изилдөө ыкмасын колдонсо болот. Объекттин бетинен чыккан мазоктун сандык жана сапаттык составы боюнча маалыматтар боюнча микроорганизмдер тарабынан бул чөйрөнүн популяциясынын даражасы аныкталат.
