Жакында адамдын ар кандай жугуштуу ооруларын диагностикалоонун ишенимдүү, өтө сезгич жана тез ыкмасы иштелип чыкты. Бул ыкма "ПЦР анализи" деп аталат. Бул эмне, анын маңызы эмнеде, ал кандай микроорганизмдерди ачып бере алат жана аны кантип туура кабыл алуу керек, биз макалабызда айтып беребиз.
Ачылуулар таржымалы
Полимераздык чынжыр реакциясы (ПТР) ыкмасын 1983-жылы америкалык илимпоз Кэри Муллис ойлоп тапкан. Алгач диагностикалык ыкма анын жаратуучусу иштеген Cetus Corporation тарабынан патенттелген. Бирок 1992-жылы бардык укуктар жана патенттер Хоффман-Ла Рошко сатылган. Андан кийин, окшош изилдөөлөр параллелдүү жүргүзүлүп, Алиса Чен, Дэвид Эдгар, Жон Трелл сыяктуу башка америкалык биологдор тарабынан жазылганы белгилүү болду. 1980-жылы советтик окумуштуулар А. Слюсаренко, А. Каледин жана С. Городецкий дагы бул маселе менен алектенишкен. Ошондуктан, жалгыз автордук укук ээсин аныктоо мүмкүн болгон жок. Көптөгөн көрүнүктүү биохимиктер полимераздык чынжыр реакциясынын техникасын өнүктүрүүгө белгилүү бир салым кошушкан жана өздөрүнүн инновацияларына патент алышкан. Учурда талдоо жүрүп жататПТР бардык жерде атайын жабдылган лабораторияларда жүргүзүлөт.
ПЦР диагностикалык методунун маңызы
ПТР анализи: бул эмне жана ал кантип иштейт? Методдун маңызы атайын ДНК-полимераза ферментинин жардамы менен жасалма шарттарда белгилүү бир микробдук чөйрөнүн көлөмүн көбөйтүү болуп саналат. Бул үчүн бар болгон ДНК материалы көп эсе көбөйтүлөт. Ошентип, үлгүдө патогендик микроорганизм бар болсо, биохимиялык лабораториялык манипуляциялардын эсебинен анын өлчөмү көбөйөт жана микроскоп менен бактерияны аныктоо кыйынга турбайт.
Материалдык изилдөө кантип жүргүзүлөт?
Талдоо үчүн талап кылынат:
- ДНК матрицасы;
- материалдын учтарын бириктирүүчү праймерлер;
- ысыкка чыдамдуу ДНК-полимераза ферменти;
- ферменттердин туура иштешин камсыз кылган химиялык заттар;
- ДНК материалынын өсүшү жана өнүгүшү үчүн тиешелүү шарттарды түзүү үчүн зарыл буфердик эритме.
ПЦР жүргүзүү үчүн үч этаптан турган 25-30 кайталоо аткарылат: денатурация, күйдүрүү жана узартуу.
Полимердик чынжыр реакциясын анализдөө үчүн атайын түзүлүш – күчөткүч колдонулат. Заманбап жабдуулар диагностика учурундагы каталарды жоюу үчүн түтүктөрдү жылытуу жана муздатуу үчүн керектүү программаны коюуга мүмкүндүк берет.
Диагностика кайда колдонулат?
Полимердик чынжыр реакциясы ыкмасы медицинанын ар кандай тармактарында колдонулат:
- кылмышкерлер мененчач, шилекей же кан сыяктуу генетикалык материалды аныктайт;
- ПЦР кан анализи генотипке жардам берет, мисалы, белгилүү бир дарыга жеке генетикалык мүнөздүү реакцияны аныктоо үчүн;
- бул ыкманы адамдардын ортосундагы үй-бүлөлүк байланыштарды аныктоо үчүн колдонуу;
- Эң популярдуу ПТР ыкмасы медициналык диагностикада ар кандай жугуштуу ооруларды аныктоочу болуп калды.
ПЦР кандай инфекцияларды аныктайт?
Демек, медицина ПЦР анализин көптөн бери жана ийгиликтүү колдонуп келет. Бул эмне, биз мурунтан эле билебиз. Жана аны менен кандай патогендерди аныктоого болот? Төмөнкү инфекциялык оорулар ПТР ыкмасы менен аныкталат:
- гепатит А, В, С;
- уреаплазмоз;
- кандидоз;
- хламидиоз;
- микоплазмоз;
- гарднереллез;
- жугуштуу мононуклеоз;
- трихомониаз;
- папилломавирус инфекциясы;
- туберкулез;
- герпес инфекциясы 1 жана 2;
- геликобактериоз;
- цитомегаловирус;
- дифтерия;
- сальмонеллез;
- ВИЧ инфекциясы.
Ошондой эле рактын диагностикасында ПЦР ыкмалары колдонулат.
Усулдун артыкчылыктары
ПТР диагностикасынын бир нече артыкчылыктары бар:
- Жогорку сезгичтик. Ал тургай, микроорганизмдердин ДНКсынын бир нече молекуласы болгон учурда да, ПЦР анализи инфекциянын бар экендигин аныктайт. Бул ыкма өнөкөт жана жашыруун пайда болгон ооруларга жардам берет. Көбүнчө мындай учурларда микроорганизмбашка жол менен иштетүүгө болбойт.
- Кандай гана материал болбосун изилдөө үчүн ылайыктуу, мисалы, шилекей, кан, жыныс органынын секрециясы, чач, эпителий клеткалары. Эң кеңири таралганы - бул ПЦР үчүн кандын жана заара-жыныс органынын мазоктун анализи.
- Узак мөөнөттүү түшүм талап кылынбайт. Автоматташтырылган диагностикалык процесс изилдөөнүн жыйынтыгын 4-5 сааттан кийин алууга мүмкүндүк берет.
- Усул дээрлик 100% ишенимдүү. Жалган терс натыйжалардын айрым учурлары гана катталды.
- Бир материалдын үлгүсүнөн патогендердин бир нече түрүн аныктоо мүмкүнчүлүгү. Бул ооруну диагностикалоо процессин тездетип гана тим болбостон, материалдык чыгымдарды да бир кыйла азайтат. Көбүнчө дарыгер комплекстүү ПЦР анализин дайындайт. Алты козгогучту аныктоодон турган экспертизанын баасы болжол менен 1500 рублди түзөт.
Анализге даярдануу боюнча сунуштар
ПЦР изилдөө учурунда жыйынтыктар ишенимдүү болушу үчүн диагностикага алдын ала даярдануу боюнча сунуштарды аткаруу менен тесттен өтүшүңүз керек:
- Шилекей берүүдөн мурун сынама алуудан 4 саат мурун тамактануудан жана дары ичүүдөн баш тартуу керек. Процедуранын алдында дароо оозуңузду кайнак суу менен чайкаңыз.
- Жогорудагы эрежелерди жаактын ички бетинен үлгү алууда да сактоо керек. Чакандан кийин бездин секрециясын белгилөө үчүн териге жеңил массаж жасоо сунушталат.
- Заара көбүнчө үйдө чогултулат. Бул үчүн, кылдат даараткана жүргүзүү керекжыныс органдары. Стерилдүү пластик идишке 50-60 мл заара чогултуу. Материалдын тазалыгын камсыз кылуу үчүн аялдарга кындын ичине тампон киргизүү, ал эми эркектерге тери бүктөмдөрүн мүмкүн болушунча артка тартуу сунушталат. Айыз учурунда кайрымдуулук кылбаңыз.
- Сперманы донорлоо үчүн үлгү алуудан 3 күн мурун жыныстык катнаштан баш тартуу керек. Дарыгерлер саунага барбоого жана ысык ваннага түшпөөгө, спирт ичимдиктерин жана ачуу тамактарды ичпөөгө кеңеш беришет. Сынакка 3 саат калганда заара кылуудан баш тартышыңыз керек.
- Заара-жыныс органдарынан мазок алуу үчүн, мисалы, хламидиоз үчүн ПТР анализи жүргүзүлсө, аялдарга да, эркектерге да 3 күн жыныстык эс алуу сунушталат. Анализге 2 жума калганда антибактериалдык препараттарды ичүүгө болбойт. Бир жума бою интимдик гелдерди, майларды, кындын шамдарын, жуунууну токтотуу керек. Текшерүүгө 3 саат калганда заара чыгаруудан баш тартуу керек. Менструация учурунда проба алынбайт, кан токтогондон 3 күндөн кийин гана сийдик-жыныс органынын мазогун алса болот.
Кош бойлуулук учурундагы ПТР
Баланы күтүү мезгилинде көптөгөн жыныстык жол менен жугуучу инфекциялар түйүлдүктүн нормалдуу өнүгүүсү үчүн өтө коркунучтуу. ЖЖБИ спровоцироваться внутричных өсүү, боюнан түшүп калуу же мөөнөтүнөн мурда төрөлүү, баланын тубаса кемтиктери. Ошондуктан, кош бойлуулуктун башталышында ПЦР текшерүүдөн өтүү өтө маанилүү. Каттоодон өткөндөн кийин анализ тапшыруу керек - 12 жумага чейин.
Материал жатын моюнчасынан атайын щетка менен алынат. Процедура оорутпайт жана балага коркунуч туудурбайт. Адатта, кош бойлуулук учурунда, анализ ПЦР ыкмасы менен хламидиоз, ошондой эле уреаплазмоз, микоплазмоз, цитомегаловирус, герпес, папилломавирус үчүн жүргүзүлөт. Мындай текшерүү комплекси ПЦР-6 деп аталат.
ВИЧ диагнозу үчүн ПТР
Полимераздык чынжыр реакциясы ыкмасы организмдеги өзгөрүүлөргө жана диагноздун шарттарына өтө сезгич болгондуктан, натыйжага көптөгөн факторлор таасир этиши мүмкүн. Ошондуктан, ВИЧ инфекциясына ПЦР анализи ишенимдүү ыкма эмес, анын натыйжалуулугу 96–98% түзөт. Калган 2-4% учурларда тест жалган оң жыйынтыктарды берет.
Бирок кээ бир учурларда ВИЧ-ПЦР диагностикасы өтө зарыл. Ал, адатта, жалган-терс ELISA натыйжасы бар адамдарга берилет. Мындай көрсөткүчтөр адамда вируска каршы антителолор пайда боло электигин көрсөтүп турат жана алардын саны бир нече эсе көбөйбөсө аны аныктоо мүмкүн эмес. Дал ушул нерсеге кандын ПЦР анализин өткөрүү менен жетишүүгө болот.
Бул диагностика ВИЧ-позитивдүү энеден төрөлгөн биринчи жылдагы балдар үчүн да зарыл. Бул ыкма баланын абалын ишенимдүү аныктоонун жалгыз жолу.
Гепатиттин диагностикасы үчүн ПТР
Полимераздык чынжыр реакциясы ыкмасы гепатит А, В, С вирусунун ДНКсын инфекцияга антителолор пайда болгонго чейин же оорунун симптомдору башталганга чейин аныктоого мүмкүндүк берет. С гепатити үчүн ПТР анализи өзгөчө натыйжалуу, анткени 85% учурларда бул оору симптомсуз жана симптомсуз өтөт.өз убагында дарылоо өнөкөт стадиясына өтөт.
Патогенди өз убагында аныктоо татаалдашуудан жана узак мөөнөттүү дарылоодон качууга жардам берет.
Комплекстүү ПТР экспертиза
Комплекстүү ПТР анализи: бул эмне? Бул полимердик чынжыр реакциясы ыкмасын колдонуу менен текшерүү, ал бир эле убакта инфекциянын бир нече түрүн аныктоону камтыйт: mycoplasma genitalium, mycoplasma hominis, gardnerella vaginalis, candida, трихомоналар, цитомегаловирус, ureaplasma urealiticum, 1 жана 2 типтеги герпес, gonomallheapi, pa. Мындай диагностикалык баасы 2000 3500 рублга чейин. клиникага, колдонулган материалдарга жана жабдууларга, ошондой эле анализдин түрүнө жараша: сапаттык же сандык. Сиздин учурда эмне зарыл - дарыгер чечет. Кээ бир учурларда, жөн гана патогендин бар экенин аныктоо үчүн жетиштүү болот, башка, мисалы, ВИЧ-инфекциясы менен, сандык титр маанилүү ролду ойнойт. Жогорудагы бардык козгогучтарды аныктоодо текшерүү "ПЦР-12 анализи" деп аталат.
Талдоо жыйынтыктарынын стенограммасы
ПЦР анализин чечмелөө кыйын эмес. Көрсөткүчтүн 2 гана шкаласы бар – «оң жыйынтык» жана «терс натыйжа». Патоген табылганда, дарыгерлер оорунун бар экенин 99% ишеним менен тастыктап, бейтапты дарылоону башташат. Инфекцияны аныктоонун сандык ыкмасы менен тиешелүү тилкеде табылган бактериялардын сандык көрсөткүчү көрсөтүлөт. Дарыгер гана оорунун деңгээлин аныктап, керектүү дарылоону дайындай алат.
Кээ бир учурларда, мисалы, ВИЧ-инфекциясын ПЦР менен аныктоодо терс натыйжа бергенде, алынган көрсөткүчтөрдү тастыктоо үчүн кошумча текшерүүлөрдү жүргүзүү зарыл болуп калат.
Тестти кайда тапшыруу керек?
ПЦР тестин кайдан тапшыруу керек: мамлекеттик клиникадабы же жеке лабораториядабы? Тилекке каршы, муниципалдык медициналык мекемелерде жабдуулар жана ыкмалар көп учурда эскирип калган. Андыктан заманбап жабдыктары бар, жогорку квалификациялуу кадрлары бар жеке лабораторияларга артыкчылык берүү жакшы. Кошумчалай кетсек, жеке клиникада натыйжаларды тезирээк аласыз.
Москвада көптөгөн жеке лабораториялар ар кандай инфекциялар үчүн ПЦР анализин сунуштайт. Мисалы, «Вита», «Комплекс клиникасы», «Бактылуу үй-бүлө», «Уро-Про», «ПЦР» сыяктуу клиникаларда анализ жүргүзүлөт. Экспертизанын баасы 200 рублга чейин. бир патогенди аныктоо үчүн.
Жугуштуу ооруларды ПЦР менен диагностикалоо көпчүлүк учурларда инфекциянын алгачкы стадиясында организмдеги патогенди аныктоонун тез жана ишенимдүү жолу болуп саналат деген тыянак чыгарууга болот. Бирок, дагы эле, кээ бир учурларда, ал башка диагностикалык ыкмаларын тандоо керек. Мындай изилдөөнүн зарылдыгын бир гана адис аныктай алат. ПЦР анализин чечмелөө да кесипкөй мамилени талап кылат. Дарыгердин кеңешин аткарып, керексиз анализдерди тапшырбаңыз.
